1 色譜分析法 ：
色譜法是一種分離分析方法。它利用樣品中各組分與流動相和固定相的南影作用力不(bù)同(吸附、分配、交換等性能上的差異)，先将它們(men)舞都分離，後按一定順序檢測各組分及其含量的方法。
2 色譜法的分離原理 ：
當混合物随流動相流經色譜柱時(shí)，就會(huì)與柱中固定相發生作用(溶長下解、吸附等)，由于混合物中各組分物理化學性質和結構上的差異，與固錯錯定相發生作用的大(dà)小、強弱不(bù)同，在同一推制國動力作用下，各組分在固定相中的滞留時(shí)間不(bù)同，從而使混合物房內中各組分按一定順序從柱中流出。這種利用各組分厭請在兩相中性能上的差異，使混合物中各組分分離的技術，稱為(wèi)色譜法南冷。
3 流動相 ——色譜分離過程中攜帶組分向前移動的文子物質。
4 固定相 ——色譜分離過程中不(bù)移動的具有吸附活性的固體或是塗漬在載我大體表面的液體。
5 色譜法的特點： (1)分離效率高，複雜混合物，有機同系物靜畫、異構體。(2)靈敏度高，可以檢測出μg.g-1有的(10-6)級甚至ng.g-1(10-9)級的物質量。(3朋快)分析速度快，一般在幾分鐘(zhōng)或幾十分鐘(zhō新舊ng)内可以完成一個試樣的分析。(4)應用範圍廣，氣相色譜：沸點議爸低(dī)于400℃的各種有機或無機試樣的分析。液相色視著譜：高沸點、熱不(bù)穩定、生物試樣的分離分析。(5)高選擇長朋性:對性質極為(wèi)相似的組分有很強的是睡分離能力.。不(bù)足之處：被分離組分的定性較為(wèi)困難。分下
6 色譜分析法的分類 ：按兩相狀态分類，按操作形式分類，按分離原理分類北區。
7 按兩相狀态分類 ： 氣相色譜(Gas Chroma作身tography, GC)，液相色譜(Liquid Chromatogra山知phy, LC)，超臨界流體色譜 (Supercritical 花藍Fluid Chromatography, SFC)。氣相色譜：畫放流動相為(wèi)氣體(稱為(wèi)載氣)。常用的她車氣相色譜流動相有N2、H2、He等氣體，按分離柱不(bù友微)同可分為(wèi)：填充柱色譜和毛細管柱色譜;按固定相的不(b跳低ù)同又分為(wèi)：氣固色譜和氣液色譜。液相色譜：流動相為(w讀遠èi)液體(也稱為(wèi)淋洗液)。按固定相的不(bù)跳上同分為(wèi)：液固色譜和液液色譜。超臨界流體色譜：流動相為體匠(wèi)超臨界流體。超臨界流體是一種介于氣體和液體之間的狀态。超臨能謝界流體色譜法是集氣相色譜法和液相色譜法的優勢而歌劇發展起來的一種新型的色譜分離分析技術，不(bù)僅我老能夠分析氣相色譜不(bù)宜分析的高沸點、低(dī)和樹揮發性的試樣組分，而且具有比高效液相色譜更快的分析速率和更高的柱效率。
8 按操作形式分類 ： 柱色譜(Column Chrom河我atography, CC):固定相裝在子花柱管内;包括填充柱色譜和毛細管柱色譜。紙色譜(Paper友男 Chromatography, PC)固定相為(w議熱èi)濾紙;采用适當溶劑使樣品在濾紙上展開(kāi)而進行分離。薄層學鐵色譜(Thin Layer Chromatography有件, TLC) 固定相壓成或塗成薄層;操作區吃方法同紙色譜。
9 按分離原理分類 ： 吸附色譜(Absorpt就厭ion chromatography);分配色譜(Parti司要tion Chromatography);離子(zǐ)交換色譜(Ion E見跳xchange Chromatography);凝膠色譜(Ge媽匠l Chromatography)。
10 色譜圖 ： 組分在檢測器(qì)上産生的信号強度線文對時(shí)間(t)所作的圖，由于它記錄了各組分流出店得色譜柱的情況，所以又叫色譜流出曲線。流出曲線的突起部分稱為(w習音èi)色譜峰。
11 色譜保留值 ：
色譜保留值是色譜定性分析的依據，它體現了各年兵待測組分在色譜柱上的滞留情況。在固定相中溶解性能越好(hǎo)，或與固定男間相的吸附性能越強的組分，在柱中的滞留時(shí)間越長(cháng)答這，或者說(shuō)将組分帶出色譜柱所需的流動相體積越大(d拿空à)。所以保留值可以用保留時(shí)間和保留體積兩套參數來描述。
12 色譜圖上的色譜流出曲線可以說(shuō)明什麼問題 ：如為
根據色譜峰的數目，可判斷樣品中所含組分的最少個數房著;根據色譜峰的保留值進行定性分析;根據色譜峰的面積或峰高進行定低站量分析;根據色譜峰的保留值和區域寬度評價色譜柱的分離效能;根據兩峰間的吃鄉距離，可評價固定相及流動相選擇是否合适。
13 分配比 ：分配比是指，在一定溫度下，組分在兩相學嗎間分配達到平衡時(shí)的質量比。
14 在色譜流出曲線上，兩峰之間的距離主要由兩組分在兩相間的分配系用冷數還是擴散速度決定?為(wèi)什麼?
答(dá)：分配系數。兩峰間的距離由熱力學因素決定，兩組分懂新在兩相中分配系數差異越大(dà)，兩峰間信看的距離則相差越大(dà)，越容易被分離。而擴散速度是動力學因素，反映在色劇快譜流出曲線上即為(wèi)色譜峰的區域寬度(形狀)。
15 色譜理論需要解決的問題 ：
色譜分離過程的熱力學和動力學問題。影響分離及柱效的因素與提高柱效什懂的途徑，柱效與分離度的評價指标及其關系。
16 組分保留時(shí)間為(wèi)何不(bù)同?色譜峰為她如(wèi)何變寬?
組分保留時(shí)間：色譜過程的熱力學因素控制;(組分和低報固定液的結構和性質)。色譜峰變寬：色譜過程的動力學因素控制;(兩相中鐘科的運動阻力，擴散作用)。塔闆理論和速率理論分别從熱力學和動力學的生媽角度闡述了色譜分離效能及其影響因素。
17 半經驗理論 ：
将色譜分離過程比拟作蒸餾過程，将連續的色譜分離過程分割成多次的平衡過程的上鐘重複(類似于蒸餾塔塔闆上的平衡過程)。
18 塔闆理論的特點 ：
塔闆理論引入了塔闆數和塔闆高度作為(wèi)柱效的衡量指标;雜線不(bù)同物質在同一色譜柱上的分配系數不(bù)同，用有效塔闆器河數和有效塔闆高度作為(wèi)衡量柱效能的指标時能對(shí)，應指明測定物質;柱效不(bù)空能能表示被分離組分的實際分離效果，當兩組分的分配系數K相同話大時(shí)，無論該色譜柱的塔闆數多大(d體制à)，都無法分離。
19 塔闆理論的不(bù)足 ：
塔闆理論的基本假設不(bù)符合色譜柱的實際分離過程。塔闆業要理論無法解釋同一色譜柱在不(bù)同的流動相流速下柱效不慢我(bù)同的實驗結果，不(bù)能說(shuō)明問船色譜峰為(wèi)什麼會(huì)展寬，同時你裡(shí)未能指出影響柱效的因素及提高柱效的途徑和方法。
20 速率方程 (也稱範第姆特方程式)：
H = A + B/u + C·u ， H：塔闆高度; u：流路員動相的平均線速度(cm/s)。 A ─渦流擴散項 ：A與流動相性質、流靜河動相速率無關。要減小A值，需要從提高固定相的顆粒細度和均勻性以及明低填充均勻性來解決。對于空心毛細管柱，A=0。固定相顆粒越小dp↓，填充的越均勻作信，A↓，H↓，柱效n↑。表現在渦流擴散所引起的色譜峰變寬現象減輕，色譜峰較窄短能。 B/u —分子(zǐ)擴散項 ：存在着濃度差，産生縱向擴散明視;擴散導緻色譜峰變寬，H↑(n↓)，分離變差;;分子(zǐ)擴散項與流速有關唱亮，流速↓，滞留時(shí)間↑，擴散↑;擴散系數：Dg 船哥∝(M載氣)-1/2 ; M載氣↑，B值↓。謝頻 C ·u —傳質阻力項 ：dp↓， df↓, D ↑ ,可降低媽湖(dī)傳質阻力。
21 H - u 曲線與最佳流速 ：
由于流速對這兩項完全相反的作用，流速對柱效的總影響使得(de)舊歌存在着一個最佳流速值，即速率方程式中塔闆高度對流速的一吧嗎階導數有一極小值。以塔闆高度H對應流速u作圖，曲線最低生但(dī)點的流速即為(wèi)最佳流速。
22 速率理論的要點 ：
組分分子(zǐ)在柱内運行的多路徑與渦流擴散、人市濃度梯度所造成的分子(zǐ)擴散及傳質阻力使兩相間的年個分配平衡不(bù)能瞬間達到等因素是造成色譜峰擴展、空用柱效下降的主要原因;通(tōng)過選擇适當的固定相粒度、載氣種類廠我、液膜厚度及載氣流速可提高柱效;速率理論為(wèi)色譜分離科討和操作條件選擇提供了理論指導。闡明了流速和柱溫對柱效及分離的影響女討;各種因素相互制約，如(rú)載氣流速增大(dà)，分子(zǐ)不煙擴散項的影響減小，使柱效提高，但同時(shí)傳質阻報快力項的影響增大(dà)，又使柱效下降;柱溫升高，有知友利于傳質，但又加劇(jù)了分子(zǐ)擴散的影響。選擇最佳條件兵廠，才能使柱效達到最高。
23 色譜定性方法 ：
1 、與标樣對照的方法 ：利用保留值定性：通(tōng)過對比一黑試樣中具有與純物質相同保留值的色譜峰，來确定試樣中是否海店含有該物質及在色譜圖中的位置。不(bù)适用于不(bù)同儀器(qì)上獲得(鄉鄉de)的數據之間的對比。利用加入法定性：将純拿身物質加入到試樣中，觀察各組分色譜峰的相對變化。2 、利用文獻保留上土值定性 ：利用相對保留值r21定性。相對保留值r21僅與柱溫和固定相機道性質有關。在色譜手冊中都列有各種物質在不(bù)同固定相上的保留數據，可以用站玩來進行定性鑒定。
24 色譜定量分析 ：
1 、定量校(xiào)正因子(zǐ) ：試樣中各組分質量與其色譜峰面積成器海正比，即：m i = fi’ &midd人間ot;Ai ;絕對校(xiào)正因子(zǐ)：比例系數f i ，單靜訊位面積對應的物質量： f i ’ =m i 錯件/ Ai ;相對校(xiào)正因子(zǐ)f i ：得村即組分的絕對校(xiào)正因子(zǐ)與标準物質的絕對校(xiào)正因老說子(zǐ)之比。
2 、常用的幾種定量方法 ：
( 1 )歸一化法 ：特點及要求：歸一化對藍法簡便、準确;進樣量的準确性和操作條件的變動對測定結果影響不(bù)大(dà)刀公;僅适用于試樣中所有組分全出峰的情況。
(2 )外标法 ——标準曲線法：特點及要求：外标法不(bù)使用校(xiào在自)正因子(zǐ)，準确性較高，操作條件變化對結果準确性影響購理較大(dà)。對進樣量的準确性控制要求較弟唱高，适用于大(dà)批量試樣的快速分析。多理
( 3 )内标法 ：内标物要滿足以下要求：(a)試樣中不(b腦內ù)含有該物質;(b)與被測組分性質比較接近;(c)土黃不(bù)與試樣發生化學反應;(d)出峰位置應位于被測組分附近，且能但懂分離開(kāi);(e)加入量适中并與待測組分接近。内标法特點 ：内标愛視法的準确性較高，操作條件和進樣量的稍許變動對定量結果的影響不(bù)大讀為(dà);每個試樣的分析，都要進行兩次稱量資對，不(bù)适合大(dà)批量試樣的快速分析;若将内标法中的試樣取樣量醫就和内标物加入量固定，則：wi=Ai/As *常數。