食品安全快速檢測方法彙總一覽表
01概念
快速檢測的定義 :包括樣品制備在内，能夠在短(算雜duǎn)時(shí)間内出據檢測結果的行為(wèi)稱之為(wèi)快速檢麗長測。通(tōng)常認為(wèi)，理化檢驗方法一般在兩個小時(shí)内吃是能夠出結果的即可視為(wèi)快速方法;微生物檢驗吧理方法與常規方法相比，能夠縮短(duǎn)1/2或1/3時(sh藍分í)間出具具有判斷性意義結果的方法即可視為(wèi)懂車快速方法;現場快速檢測方法一般在30min内能夠出結果得有，如(rú)果能夠在十幾分鐘(zhōng)内甚至幾分鐘(線公zhōng)内出具結果的即是較好(hǎo)的方法。
快速檢測體現在三方面：
1 實驗準備要簡化；
2 樣品經簡單前處理後即可測試，後采用先進快速的樣品處理方式；
3 分析方法簡單，快速，準确。
食品安全快速檢測分類：
1 按分析地點：現場快速檢測，實驗室快速檢測；
2 按定性定量：定性快速篩選檢驗，半定量檢驗可下，全量檢驗。
02檢測項目
食品安全問題主要有害污染物:
1 農藥,化肥:有機磷,有機氯，硝酸鹽；
2 獸藥：興奮劑，鎮靜劑，抗生素；
3 重金(jīn)屬離子(zǐ)：镉，鉛，汞火頻，鉻，砷，钼；
4 生物毒素：黃曲黴毒素，嘔吐毒素，肉毒素；
5 緻病菌：大(dà)腸杆菌，沙門氏菌，葡萄球菌。
農藥殘留檢測方法
生物法：
1 生物化學測定法(速測卡法、酶抑制率法)；
2 分子(zǐ)生物學方法(如(rú)：ELISA)；
3 活體生物測定法(發光細菌，大(dà)型水藻，家(唱月jiā)蠅)；
4 生物傳感器(qì)法。
化學方法： 酶抑制法、酶聯免疫檢測法。
檢測方法 GB/T 5009.199-2003 蔬菜中有機磷和氨基甲又他酸酯類農藥殘留量的快速檢測 GB 5009.33-2016 食品安全國家(ji校嗎ā)标準 食品中亞硝酸鹽與硝酸鹽的測定（實施日期2017-6-23）
▼ 速測卡法
速測卡法檢測原理： 膽堿醋酶可催化靛酚乙城低酸酮(紅色)水解為(wèi)乙酸與靛酚(藍色)有機磷或氨基甲酸脂類農藥對膽堿酯時亮酶有抑制作用，使催化、水解，變色的過程發生改變，由此判斷樣拿章品中是否含有過量有機磷或氨基甲酸酯類農藥的殘留。
分析步驟：
A.提取：幹淨的菜樣品---剪碎(1CM左右見見遠方)---取5g于帶蓋瓶中---加純淨水或緩沖溶液(l0mL)---震搖(5他男0次)---靜置(2min以上)。
B.預反應：取一片速測卡，用白色藥片沾取提取液，放上民置10min以上進行預反應，有條件時(shí)在37℃微用恒溫裝放置中10min.預反應後的藥片表面必須錯體保持濕潤。
C.反應：将速測卡對折，用手捏3min或用恒溫裝置恒溫3mi歌討n，使紅色藥片與白色藥片疊合發生反應
D:每批測定應設一個純淨水或緩沖液的空白對照卡。
速測卡法結果判定：
  與空白對照卡比較，白色藥片不(bù)變事老色或略有淺藍色均為(wèi)陽性結果，不(bù)變藍為(w地畫èi)陽性結果，說(shuō)明農藥殘留都低量較高，顯淺藍色為(wèi)弱陽性結果，說(shuō)明農藥殘留喝西兩相對較低(dī)。白色藥片變為(wèi)天藍色或空白對照卡片相金謝同，為(wèi)陰性結果。對陽性結果的樣品，可用其他(tā)分析方法進一步确定明站具體農藥品種和含量。
▼ 分光光度計法(抑制率法)
抑制率法原理：一定條件下，有機磷和氨基甲酸酯類農藥對膽堿酶正常快間功能有抑制作用，其抑制率與農藥的濃度成正相關，正常情況下，酶催化乙酰膽購朋堿水解，其水解産物與顯色劑反應，産生黃色物質，用分我不光光度計在412nm處測定發光度随時(shí)間的也機變化值，計算出抑制率，通(tōng)過抑制率可以判斷出樣品他關中是否有有機磷确和氨基甲酸酯類農藥的存在。
▼ 酶傳感器(qì)法
酶傳感器(qì)法原理：它将活性物質酶覆我路蓋在電極表面，酶與被測的有機物或無機物反應，形成一種能件門被電極響應的物質。
生物傳感器(qì)在食品分析中的應用： 1 食品成分分廠外析； 2 食品添加劑的分析；3 農藥和抗生素殘留量分析； 4 微紙媽生物和生物毒素的檢驗； 5 食品限度的檢驗。
▼ 蔬菜中硝酸鹽含量的快速測定
方法原理：将NO3-還原N02-後，芳香胺與亞硝酸雪哥根離子(zǐ)發生重氮化反應，生成重氮鹽，重氮鹽再與芳香族化合物發生計兒偶聯反應，生成一種紅顔色偶氮化合物(偶氮染料)，其顔色強度與硝酸鹽器朋含量呈正比，通(tōng)過試紙由無色變為(wèi)紅色，變色的試紙放得藍入基于光學傳感器(qì)原理的硝酸鹽檢測儀中比色測定硝酸鹽這關含量。
儀器(qì)與材料：硝酸鹽試紙. 快速測定儀。
▼ 硝酸鹽速測管 方法原理：按照GB 5009. 33鹽酸萘乙二通內胺顯色原理，在格林(lín)試劑中加入硝酸鹽轉化劑，并将其做成速測管，速黑下測管中的試劑可将N03-還原為(wèi)N02-後，再與芳香胺(氨基苯磺酸)月知 發生重氮反應，生成重氮鹽，重氮鹽再與芳香族化合物( 飛信A-祭胺)發生偶聯反應，生成紅色偶氮化合物(又叫偶氮染料)，顔色相區深淺與硝酸鹽含量成正比，與标準色卡比對，确定硝酸鹽含量。
适用範圍：乳品、飲用水、蔬菜等食物中硝酸鹽的快速檢測； 獸藥殘留檢測方法
▼ 獸藥殘留定義
動物産品的任何可食部分所含獸藥的母體化合物及其代謝們著物，以及與獸藥有關的雜質殘留。
  03檢測方法及原理
▼ 微生物法檢測原理
檢測管中的培養基預先接種了嗜熱脂肪芽孢杆菌，并含有細菌生長(c工窗háng)所需的營養以及pH指示劑。隻需加入算謝100ul樣品于檢測管中。将含有樣品的檢測管放入64±1℃水浴關去中加熱一段時(shí)間。奶或奶制品在培養基中迅速費森擴散，若該樣品中不(bù)含有抗生素(或者抗生素低(dī)于檢唱道測值)，嗜熱脂肪芽孢杆菌将在培養基中生長(cháng)，葡萄糖分就錢解後所産生的酸會(huì)改變pH指示劑顔色，由紫色變為(wèi)黃色。相為多反若高于檢測限的抑菌劑，則嗜熱脂肪芽孢杆菌不(bù)會(huì你藍)生長(cháng)，指示劑顔色不(bù)變 仍為(wèi)紫街內色。 黃色表明該樣品沒有抗生素殘留或抗生素殘留的含量低(dī)于試劑盒的兒喝檢測限(陰性) ，紫色表明該樣品中含有抗生素殘留且濃度議子高于試劑盒的檢測限(陽性) 如(rú)果介于黃色紫色之間，則說(街音shuō)明該樣品可能不(bù)含抗生素殘留或村遠者抗生素殘留的含量低(dī)于試劑盒的檢測限(部分陽性)。
▼ 膠體金(jīn)法
概念：氯金(jīn)酸在還原劑作用下，可聚合成一定大(dà)小的金(jī個訊n)顆粒，形成帶負電的疏水膠溶液。由于靜電作用門讀而成為(wèi)穩定的膠體狀态。
▼ 免疫金(jīn)标記技術原理：膠體金(jīn)顆粒表面負電荷區我與蛋白質的正電荷基團因靜電吸附而形成牢固結合。膠體金(jī能路n)對蛋白質有很強的吸附功能，蛋白質等高分子(zǐ白司)被吸附到膠體金(jīn)顆粒表面，無共價鍵形成，标林姐記後大(dà)分子(zǐ)物質活性不(bù)發生改變。金(jīn)顆銀城粒具有高電子(zǐ)密度的特性。金(jīn)标蛋白在相應的配體處大弟技(dà)量聚集時(shí)，在顯微鏡下可見黑褐色顆粒或船跳肉眼可見紅色或粉紅色斑點。
▼ 放射免疫測定法
放射免疫測定法原理： 1 放射免疫RIA：以标記抗原與反應系統中未标書我記抗原競争結合特異性抗體來測定的待檢樣品白高中抗原量。 2 免疫放射IRMA：以過量标記抗體與抗人著原非競争結合，采用固相免疫吸附載體分離遊離和結合标記抗體。 3 其他(t音些ā)：放射受體分析RRA；放射配體結合分析RBA。
▼ 競争性檢測原理：使用一種具有吸附所有β-内酰胺藥物的特殊船匠受體細菌，該細菌同14c标記的特定量青黴素G一起加入牛奶樣視間品。牛奶樣品中的任何一直β-内酰胺類均能和這種特殊标記的青黴素G競争性地對師與細菌cell上的特異性受體結合。
 ▼ RRA檢測食品中抗生素殘留的原理： 1 大友每類抗生素族均是在一個母環基礎上用不(bù)同功能民也團修飾星辰特定功效的抗生素； 2 微生物細胞表面都存在着能與各種抗生素功能基這店團結合的特異受點。結合反應是在标記的靶參考物與無标記的待測藥物之間競争進行的。美影
▼ 酶聯免疫吸附試驗
ELISA的原理： 1 抗原或抗體能以物理性吸附于固相載體表體些面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部村拿分相互吸附，并保持其免疫學活性； 2 抗原或抗體可通(tōng)過共價鍵樂吃與酶連接形成酶結合物,而此種酶結合物仍能保持其免疫學和酶學活行車性； 3 酶結合物與相應抗原或抗體結合後大冷，可根據加入底物的顔色反應來判定是否有免疫反應的存在，而且顔色反草就應的深淺是與标準中相應抗原或抗體的量成一定比例的，因答水此，可以按底物顯色的程度顯示實驗結果。
ESISA的類型： 1 雙抗夾心法(測微生計自物)； 2 間接法測抗體； 3 競争法測抗原(化肥農藥)。
雙抗體夾心法基本原理：利用連接于固相載體上的抗體和酶标抗體分别與樣品中被檢測刀長抗原分子(zǐ)上兩個抗原決定簇結合，形成固相抗體-朋筆抗原-酶标抗體免疫複合物，由于反應系統中固相抗體和酶标抗體的量相對于待測頻車抗原是過量的，因此複合物的形成量與待測抗原腦服的含量成正比(在方法可檢測範圈内),測定複合物中的酶作用于加入的底物後生成的電樂有色物質量(OD值) ，即可确定待測抗原含量。
 ▼ 間接法測抗體基本原理：将抗原連接到固相載體上，樣品吃是中待測抗體與之結合成固相抗原-受檢抗體複合物，再用酶标二抗舞樹(針對案檢抗體的抗體，如(rú)羊抗人ICG抗體)與固相大睡免疫複合物中的抗體結合，形成固相杭原-受檢抗體鄉到-酶栝二抗複合物，測定加底物後的顯色程度，測定待測抗體含量。
 ▼ 競争法測抗原基本原理：首先将特異性抗體吸附于固相載體表面愛子(包被)，經洗滌後分成兩組：一組加酶标記抗原和被測抗原的混合液唱門，而另一組隻加酶标記抗原，标本中的抗原和一定量的酶标抗原競争與固遠小相抗體結會(huì)(标本中抗原量含量愈多，離不結含在固相上的酶抗原愈少，最後的顯色也愈淺)，再經孵育洗滌後一訊加底物顯色，兩組底物降解量之差，即為(wèi)我們(men)所要測定腦說的未知抗原的量。
▼ 毒鼠強快速檢測原理：毒鼠強可以與二羟基萘二磺酸發生反應變為(wè黃海i)淺紫紅色，檢出限1ug，最低(dī)檢出濃度2ug/ml 濃度日間高時(shí)變為(wèi)深紫紅色。 ▼ 鼠藥氟乙酰胺的快速劇區檢測速測管法檢測原理：氟乙酰胺與奈氏試劑反應哥來後會(huì)出現黃紅或棕色沉澱。最低(dī)檢出濃度10u說對g/ml。
▼ 敵鼠鈉鹽的快速檢測原理：敵鼠化學名為(wèi)2-(二苯基乙酰胺)-刀通2，3二氫-1，3-茚三酮，可與三氯化鐵反應出現磚紅色。
▼ 砷的快速檢測原理：三氧化二砷與鋅粒和酸産生的新形态氫生成AsH3，其裡聽與氯化金(jīn)相遇産生反應，可使氯化金(jīn)矽膠柱變成紫紅或線錯灰紫色，在裝有氯化金(jīn)矽膠的柱中砷含量與變費她色的長(cháng)度成正比，以次可達到半定量的目的。
▼ 砷 銻 铋 汞 銀化物的快速檢測方法： “雷因須氏法”。
▼ 亞硝酸鹽的快速檢測方法原理：按國标鹽酸萘乙二胺顯色原理做成的速道道測管，與标準色卡對比定量。
▼ 酒醇儀測定甲醇的檢測原理：在20℃時(shí)，不(bù海水)同濃度的乙醇具有固定的折光率，當甲醇存在時(shí)，折光率會錯少(huì)随着甲醇濃度的增加而降低(dī)，下降值與甲醇的含量成正比。按照謝不這一現象而設計的酒醇含量速測儀，可快速顯示出樣品中酒醇含美中量。當這一含量與玻璃浮計測定出的酒醇含量出現差異時(shí)，其計厭差值即為(wèi)甲醇含量。在20℃時(shí)可直接放相定量，在非20℃時(shí)，采用于樣品相當濃度的乙醇對照液進行對小要比定量。
▼ 水法測水産品中甲醛的快速檢測原理：在女那堿性條件下，甲醛與簡笨三酚反應後使溶液出現橙紅色特征。海水由于此方法的靈敏程度較低(dī)，水産品本底存在的甲醛很難參與反應門雨。當人為(wèi)加入甲醛時(shí)，本方法可迅速檢測出來。
▼ 變質肉類的快速檢測原理：畜禽肉變質後或病害肉，其肉體内的揮發性去司鹽基氮、ph值以及過氧化物酶都會(huì)發生改內鐵變。測試酸堿度，可初步反映出其新鮮程度;測試揮發性鹽基為大氮，可判斷是否新鮮或腐敗;測試過氧化物酶，可初步判斷是說睡否是病害肉。
▼ 牛乳中尿素的快速檢測原理：尿素能夠阻斷萘胺試劑反應，不(bù)會(hu就音ì)生成紫紅色物資(zī)。由此證明乳品中含商歌有尿素成分。 檢出限：牛乳為(wèi)濃度50mg/kg;線火乳粉濃度500mg/kg。
▼ 乳品中澱粉和麥芽糊精的快速檢測原理：麥芽河低糊精或澱粉與組合碘試劑發生反應産生棕色、紫色們就或棕紫色化合物。
▼ 乳品中pro含量的快速檢測原理：考馬斯亮藍試劑在遊離狀态票司下呈紅色，當他(tā)與pro結合後變成青色，其顔色深度與pro含量成正少下比。 檢測範圍：液體樣品為(wèi)0.5g-20g/從地100g，固體樣品為(wèi)1g-40g/100g。
▼ 米面粉中吊白塊的快速檢測方法： 原理：甲醛次硫酸氫鈉在食物中分解成甲熱跳醛、次硫酸氫鈉和so2。甲醛與AHMT試劑反應生成紫色化合物 檢出限為雨火(wèi)0.05ug
▼ 水溶性非食用色素的快速檢測原理：水溶性非食用色素與脫脂羊毛染國開色後不(bù)易去除的原理對部分水溶性非食用色聽河素進行檢測。
▼ 味精谷氨酸鈉的快速檢測原理：利用谷氨酸鈉的兩性作用，加草見入甲醛一固定谷氨酸鈉的堿性，使羟基顯示出酸性，用那來氫氧化鈉标準溶液滴定，以指示劑顯示為(wèi)都開終點，得(de)出樣品中谷氨酸鈉的含量。
▼ 黃曲黴毒素：AF是一類化學結構類似的化合物，均為(wèi)二氫呋喃環和的作香豆素的衍生物。目前已發現20多種。B1是最危險的緻癌物，
熒光特性 ：紫外線下 B1B2 發藍色熒光，G1G2發綠色熱還熒光。
黃曲黴毒素AF的快速檢測技術：免疫親和柱-熒光分光光度計法和文姐免疫親和柱-HPLC法 。
  分析原理：免疫親和柱試用大(dà)劑量的黃暗坐曲黴毒素的單克隆抗體固化在水不(bù)溶又明性的載體上，然後裝柱而成。試樣中AF用一定比例的甲醇/水提取，提取液經作商過過濾稀釋後，用免疫親和柱淨化，以甲醇将親和柱上畫化的黃曲黴毒素淋洗下來，在淋洗液中加入溴溶液衍生，以提請林高測定靈敏度，然後用熒光分光光度計進行定量。也請聽可以将甲醇-黃曲黴毒素淋洗液的一部分加入HPLC中，對爸歌黃曲黴毒素B1B2G1G2分别進行定量分析； ELISA法測定黃曲黴毒素B1
1 原理：将已知抗原吸附在固态載體表面，洗除未吸附抗原，加入一定量抗體與待現技測樣品提取液的混合液，競争培養後，在固相載體表面形成抗原抗體複合物，洗除多餘影是抗體成分，然後加入酶标記對抗球蛋白的第二抗體結合物，與吸附在固體表面的抗原廠工抗體複合物結合，再加入酶的底物。在酶催化下底物降解，産生有場黃色物質，通(tōng)過酶标檢測儀測出酶底物的降解量。推出被測家鄉樣品中抗原量。
2 抗體：抗黃曲黴毒素B1的特異性單克隆抗體或抗血清包被抗見員原：黃B1與載體蛋白結合物，酶标二抗：羊抗鼠IgG與辣根過氧化酶唱金結合物； 微柱篩選法：
1 原理:樣品提取液通(tōng)過由氧化鋁與矽鎂嗎站吸附劑組成的微柱層析管，雜質被氧化鋁吸附，黃曲黴毒素被矽鎂吸附劑吸附，在波來高長(cháng)365nm紫外燈下顯示藍紫色熒光到匠環，其熒光強度與黃曲黴毒素在一定的濃度範拍友圍内成正比例關系.若矽鎂型吸附層未出現藍紫色熒光，則樣品為(wèi)陰時笑性(方法靈敏度為(wèi)5~10ug/kg )。由于日業在微柱上不(bù)能分離黃曲黴毒素B1，B2，GI，G2拍西，所以測得(de)結果為(wèi)總黃曲黴毒素含量。
▼ 細菌毒素： 内毒素 、外毒素 比較
1 産生方式：内：細菌崩解後釋放 外：合成分泌到菌體外 。
2 化學成分：内：脂多糖LPS 外：蛋白質。
▼ 間接凝集試驗定義：将可溶性抗原或抗體吸附于一種與免疫無關的，适當大(dà報歌)小的載體微利表面，再與相應抗體或可溶性抗原在适宜條件下相互作用，刀行經一定時(shí)間後出現的肉眼可見的凝物紙集現象。
▼ 食品中微生物快檢方法： 1 基于微生物代謝特征的檢紙南測方法； 2 改良培養基法；3 細菌直接計數法； 煙輛4 免疫學快速檢測技術； 5 分子(zǐ)生物學快速檢測技術；鐵火 6 自動化檢測技術； 7 生物傳感器(qì麗去)檢測技術。
▼ ATP生物發光法 檢測原理：熒光素+ATP+O2通計 (上：Mg2+)—→(下：熒光素酶)氧化型熒光素+AMP民小+PPI+H20。
▼ 阻抗測定法原理：當培養基中因微生物的代謝活動而發生化學改錯小變時(shí)，阻抗也随着改變。
▼ 溶氧——電流法檢測原理：應用的是氧氣電極法的原理。在測量開(k放器āi)始時(shí) 氧氣溶解在培養基中，随着細光對菌的生長(cháng)和繁殖，這些溶解氧不(bù)斷被消低喝耗。DOX系統通(tōng)過檢測與溶解氧量成比例的電流值來計算所含菌落總數，放書大(dà)腸菌群值。
▼ 微量量熱法：是利用細菌生長(cháng)時(shí)産生熱量的原理設計聽道而成，微生物在生長(cháng)和代謝的過程中，能産生大(dà)呢吃量的代謝熱。由于各種微生物的代謝産物熱效應不(bù)同，因此可顯示出特他美異性的熱效應曲線圖。在細菌生長(cháng)過程中，用微量量熱計測量産熱量呢熱等熱數據，經過計算機處理，繪制出以産熱量對比時(火那shí)間組成的熱曲線圖，以此推斷細菌存又都在的數量。
▼ 放射測量法：利用細菌在代謝碳水化合物時(shí)産生CO2的原理，把木空微量的放射性标記引入葡萄糖或者其他(tā)糖分子(z銀身ǐ)中。細菌生長(cháng)時(shí)，糖被利用并放出标懂姐記的CO2，将生成的放射性CO2從培養裝置中導出，利用專用的測量儀間有來測定CO2量，放射量與細菌數成正比。
▼ 快速測試片法原理：由上下兩層組成，上層的薄膜上通(tōng)過粘合劑結合光來了指示劑，并塗覆了冷水可溶性凝膠，下層的紙片上塗他體覆了改良的培養基，并印有方格以便于計數。它報錢是一種與限制備好(hǎo)的培養基系統，以每系統1ML的加樣量将樣議船品直接加到薄膜中間，蓋上含有膠凝劑和指示劑的覆蓋膜，培養後細菌在雙層膜之間生産哥綠，其代謝産物與顯色物質作用并顯色，即可直接計場讀數。
▼ 顯色培養基：是一類利用微生物自身代謝産生時木的酶與相應顯色底物反應顯色的原理來檢測微生物的新型培養基玩場。這些相應的顯示底物是由産色基團和微生物部分可代謝物質組成，在特異性酶玩廠的作用下，遊離出産色基團顯示一定顔色，直接影科觀察菌落顔色即可對菌種作出鑒定。優點：将菌株分離，鑒定結合在一起，無需對菌個暗株進行分離純化和進一步生化鑒定，大(dà)大(dà)節約樣拍遠品的分析檢測時(shí)間。
▼ 固相細胞計數spc原理：可以在單個細胞水平對細菌進行快速檢測。用分歌特殊濾膜濾過樣品後，存留在濾膜上的微生物用熒光素進行熒光染人兒色，用落射熒光顯微鏡對每個螢光點進行直觀地檢測尤其對生長(如雪cháng)緩慢的微生物，檢測用時(shí)短(duǎn)，明報畫顯優于傳統平闆計數法。
▼ 流式細胞儀的基本原理： A 待測細胞被制成單細胞懸液，經特異性熒光染鐘筆料染色後加入樣品管中，在氣體壓力下進入流式細錢是胞儀的流動室； B 流動室内充滿鞘液，鞘液和細胞懸液土嗎組成的細胞液注一起自流動室噴嘴口噴射出來有刀，進入測量區，與水平方向的激光光束垂直相交； C 被這外熒光染料染色的cell受到激烈激光照射後熒光不算，同時(shí)産生散射光，熒光強度和被測著技cell中cell成分與熒光燃料的結合程度有對視關，散射光強度一般與cell大(dà)小成正比； D 将cell發出的熒光遠老信号和散射光信号通(tōng)過熒光光電倍增管接受，積分放大(dà)反綠快轉化為(wèi)電子(zǐ)信号輸入電子(zǐ)接收儀，通(tōn報生g)過計算機将數據計算出來。多參數分析實現cell的定量關房分析，估計微生物大(dà)小形狀和數量。
▼ 多聚酶鍊式反應PCR
PCR原理：在模闆DNA、引物和4種脫氧有還單核苷酸存在的條件下依賴于耐高溫的DNA聚合酶的酶促合成反應。以欲擴增的DNA些個做為(wèi)模闆，以和模闆正鍊和負鍊末端互補的兩種寡聚核苷酸做為冷雨(wèi)引物，經過模闆DNA變性、模闆引物複性結合、并在DNA聚合酶線文作用下發生引物鍊延伸反應來合成新的模闆DNA。模通的闆DNA變性、引物結合(退火)、引物延伸合成DNA這三步構成一個P子河CR循環。每一循環的DNA産物經變性又成為(w科我èi)下一個循環的模闆DNA。這樣，目的的DNA的數還林量将以2n的形式累積，在2小時(shí)内可擴增30(n)個循環，D吃書NA量達原來的上百萬倍；
PCR過程：
1 模闆DNA的變性：模闆DNA經加熱至95℃左右一定時(shí)間後，DN跳朋A雙鍊被解離為(wèi)單鍊并遊離于溶液中的過程；
2 模闆DNA與引物的退火(複性)：人工(為爸gōng)合成的一對引物在适合的溫度下(通(tōng計窗)常50-65℃)分别與模闆DNA需要擴增間討區域的兩翼進行準确配對結合的過程；
3 引物的延伸：在适當的溫度下(通(tōng)常70~75℃)，以三磷酸裡鐵脫氧核糖核苷(dNTP)為(wèi)反應原料，DNA模如雨闆--引物結合物在TaqDNA聚合酶的作用下，單鍊核苷酸從引物的3’商中末端摻入，沿靶序列模闆,按堿基配對與半保留複制原理，合成一條新的校劇與模闆DNA鍊互補的半保留複制鍊。重複循環變性--退火--延伸三過程是相，就可獲得(de)更多的“半保留複制鍊”，而且這種問頻新鍊又可成為(wèi)下次循環的模闆.每完成一個循環需2一4這校分鐘(zhōng)，在一個由計算機控制的循環加熱器(qì)光窗上經過三十個循環，就可以把原來的樣品精确地擴子道增了2的30次方倍。
PCR特點：快速，準确，安全檢測病原體。